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如何制作动物染色体标本
更新时间:2012-10-24 点击次数:4546
内部趋于拉新的提升的情况以及利用劳动力的多种多样操作后,内部打开裂变的植物组织结构科使用于脱色剂体的介绍。致使在日常的植物骨髓内,内部是趋于持续不断裂变的,给其滴注固定的秋月仙碱能够让大多数内部趋于裂变的内部停在内部裂变中档,接下来用到常见环境变干法纪备脱色剂体,可以了获取多可介绍的脱色剂体动物标本。 进行实验器具 一、 板材 菜鸟鼠 设备 总体水平抽滤分离机、高倍显微镜、标尺抽滤分离管(10ml)、填充器(1ml)、载玻片、烧杯(400ml)、量筒(100ml)、试管架、镊子、尖嘴钳、解刨刀、吸管。 二、 化学药品 1. 2%柚子百香果酸钠饱和溶液:称取2g柚子百香果酸钠(柚子百香果酸三钠,Tri-sodium citrate, AR)溶化于100ml水蒸气蒸馏水内。 2. 1%柠檬百香果酸钠液体。 3. 500μm/ml、100mg/ml秋月仙素液体。 4. Giemsa(姬姆萨)原液(pH6.8) Giemsa染粉 1g 甘油(丙三醇,glycerine, AR) 33ml 甲醇(methyl alcoholA, AR) 45ml 将染粉倾入乳钵,加滴几下甘油,在乳钵内粉磨是直到无颗粒物到止,这时再将全部余量甘油到入,倒进60~65℃保冷箱中保冷2h后,参与甲醇搅拌装置均,保持于深褐色瓶中自备。 5. 0.067mol/L磷酸二氢钠储存液(pH6.8) Na2HPO4·12H2O11.81g (或Na2HPO4·2H2O 5.92g)[next] Ⅰ.白鼠骨髓肿瘤细胞着色体的制作的方法 工作工艺 1.爬行甲壳动物按4μg/g身体重量的摄入量经腹腔注谢秋月仙素,3~4h后处理爬行甲壳动物。 2.抽出各种动物后肢的胫骨和股骨。剪去两端。 3.将0.6~1ml 2%柠檬汁酸钠用1ml注塑器接好5#针头引入骨髓腔,将骨髓人体细胞膜核先冲向小碟拆出来注塑器针头,致使反复吸打骨髓人体细胞膜核,使人体细胞膜核团块吸附,转回10ml离心式管。 4.视骨髓量之多寡添加0.4%KCl氢氧化钠溶液8~10ml,逐个将离心法管置37±0.5℃水浴中低渗15~20min 5.以1000r/min离心法8min 6.弃上清液,沿离心式管子规格慢慢的成为新专门配制的甲醇:冰醋酸钠(3:1)规定液5ml,加规定液时要留意千万别盲目細胞团块。 7.加完紧固液后,实时用吸管将人体细胞悄悄地吸打不匀,静置紧固20min。都是这样频繁紧固2~3次,总是20min。 8.加固的血生殖細胞经离心式后,提炼主层加固液,视管底的血生殖細胞多寡加进小量新调配的加固液,将血生殖細胞团块慢慢的吸磨成悬液。 9.在整洁、湿、冷的载玻片上滴2~3滴高层受损细胞悬液,在纯酒精灯文中火烘干功能(在大气常温、干燥的地方能进行不需要)。 10.将玻片组织切片平放于支地上,内部面朝上,每片加入适量1:100 Giemsa磷酸加载液3~4ml,染料10min。 11.在污水管下细流清洁数秒,清掉Giemsa磷酸二氢钠缓解液,用块状纱条拧干玻片标本采集正方体和两侧,高倍显微镜看和介绍。 能够上面的步驟就化学合成出会确定了解的小鼠骨髓组织着色体动物标本,用以及的光学显微镜及可确定了解实验室。
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